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細胞工廠內細胞不貼壁該怎么辦
發表日期:2023-02-16

細胞工廠是近幾十年逐步出現在國內科研室和疫苗生產廠家的視線中,細胞培養已廣泛應用于醫學的各個領域,通過體外培養,可以獲得單一種類的細胞,今天根據細胞工廠廠家來跟大家分享一下使用細胞工廠來培養細胞時內部細胞不貼壁該怎么辦

細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間:消化不夠細胞本身就是成團的;若胰酶處理太久,容易造成細胞膜蛋白損傷,使細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。

解決辦法:縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度。

缺少貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無血清培養基工藝中由于缺少這種促貼壁因子,細胞的貼壁效果會下降很多。

解決辦法:更換血清。

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支原體或細菌的污染。

解決辦法:分離培養物,檢測支原體。清潔支架或培養箱。如發現支原體污染,丟棄培養物。

培養液配置、儲存不當,如 pH 值過堿,Gln 量太少等原因。

解決辦法:使用無菌醋酸溶液調整 pH 值或充入無菌 CO2。

復蘇的細胞本身狀態不好,已經老化,失去貼附性。

解決辦法:啟用新的保種細胞。

如果細胞比較珍貴或沒有備份細胞

解決辦法:可嘗試將不貼壁細胞收集離心,再用 PBS 將沉淀清洗一遍,離心后的沉淀加入胰酶重新消化接種,同時提高血清濃度到 15%~20%。

這就是細胞工廠內細胞不貼壁的原因了,希望對大家有所幫助。

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