隨著生物制藥、疫苗、單克隆抗體等行業的快速發展,細胞工廠在大規模細胞培養中的重要性愈加凸顯。細胞培養是一項嚴謹的工作,從細胞生長環境、培養基的加入、收獲細胞等方面都有嚴格把控。
細胞工廠
在利用細胞工廠收獲細胞時要嚴格按照以下流程操作:
1、培養結束后將培養液倒出,使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液(CMF-PBS)清洗(40-50 ml/層),若有需要重復清洗一次。
2、消化:消化液(10-40 ml/層)提前預熱。
3、收集:1000 rpm 離心5分鐘,去除消化液,收集細胞。
4、清洗:用CMF-PBS或培養基清洗消化過的培養器。
在收獲細胞時還要注意以下幾點:
1、確保CMF-PBS完全浸過每層培養面,并輕輕前后晃動細胞工廠,將殘留的培養液清洗干凈。
2、消化液平均分布到每層,輕輕前后左右傾斜培養器,確保消化液完全浸過培養面,輕輕拍擊培養器幫助細胞從表面脫離。
3、對于細胞工廠,由于不能清晰觀察中間層的細胞消化狀態,建議參照完全相同培養條件下的培養瓶或單層細胞工廠的消化狀態。亦可使用專用的多層細胞培養器觀察臺來觀察每層細胞的生長狀態。
細胞工廠配件
3、若清洗液或者是細胞工廠培養層存在大量細胞,則需要清洗多次或調整細胞消化的操作。
4、培養溫度的一點點偏差都可能影響到細胞的收獲率,需密切關注培養的溫度是所設定的溫度。
以上是細胞工廠收獲細胞的流程及注意事項,細胞對于環境非常敏感,做好細胞收獲工作是細胞培養成功與否的關鍵,需在各個環節都嚴格把控。








