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我們在使用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)總會(huì)遇到一些特殊情況而養(yǎng)不好細(xì)胞，今天富道細(xì)胞就來跟大家分享一下細(xì)胞培養(yǎng)瓶中細(xì)胞生長緩慢應(yīng)該怎么辦。

接種量太少。細(xì)胞長得太滿會(huì)有接觸抑制，而細(xì)胞接種濃度低，也會(huì)使細(xì)胞生長繁殖較慢。一般情況下，細(xì)胞長至80-90%可進(jìn)行傳代，當(dāng)細(xì)胞長得不太滿時(shí)進(jìn)行了傳代，會(huì)使得細(xì)胞接種濃度太低，可能導(dǎo)致細(xì)胞自分泌的物質(zhì)濃度減少，造成生細(xì)胞生長緩慢。

因此適宜的接種密度，可以促使細(xì)胞增殖，接種密度太低或太高都不利于細(xì)胞的生長增殖。

培養(yǎng)液中細(xì)胞生長所需的必須成分耗盡。培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)耗盡，細(xì)胞就會(huì)生長緩慢，所以需要定時(shí)更換培養(yǎng)液，以保證細(xì)胞生長。

如果復(fù)蘇出來的細(xì)胞量不是很多，我會(huì)在第二天進(jìn)行換液。一些細(xì)胞生長緩慢，生長周期長，也需要定時(shí)更換培養(yǎng)液。

培養(yǎng)液中一般都添加了酚紅，在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。開始時(shí)，培養(yǎng)基為粉紅色，在細(xì)胞生長過程中會(huì)產(chǎn)生乳酸和二氧化碳，導(dǎo)致培養(yǎng)液顏色變黃，不利于細(xì)胞生長。當(dāng)觀察到培養(yǎng)液變黃，基本可以進(jìn)行換液培養(yǎng)。

培養(yǎng)試劑保存不當(dāng)。

血清需保存在-20℃環(huán)境中，在4℃保存不超過一個(gè)月。培養(yǎng)液放于4℃環(huán)境中，盡快用完。培養(yǎng)液失效或質(zhì)量不好，會(huì)影響細(xì)胞的生長。當(dāng)然，這種情況比較少，培養(yǎng)液一般現(xiàn)配現(xiàn)用。如果發(fā)現(xiàn)是培養(yǎng)液質(zhì)量不好，那就換一個(gè)牌子的培養(yǎng)液吧。

細(xì)胞老化。

當(dāng)細(xì)胞傳了很多代后，細(xì)胞出現(xiàn)形態(tài)活性不好的現(xiàn)象，可能是細(xì)胞老化。癌細(xì)胞可能影響不大（我們實(shí)驗(yàn)室的癌細(xì)胞一般傳至15代活性會(huì)降低），正常人體細(xì)胞的傳代次數(shù)有限有的細(xì)胞只用到第三代就不用了，所以這個(gè)情況因細(xì)胞而異吧。